БІОХІМІЧНІ ОСОБЛИВОСТІ ГЕПАТОСТЕАТОЗУ ПРИ ВІДСУТНОСТІ ЗАПАСІВ ВІТАМІНУ А
Анотація
Робота присвячена дослідженню особливостей розвитку гепатостеатозу та інсулінорезистентності при відсутності запасів вітаміну А. Для створення вітамін-А дефіцитного стану в експерименті використали трангенних мишей, не здатних етерифікувати ретинол у печінці внаслідок нокауту гена лецитин: ретинолацилтрансферази (Lrat-/-), а тому позбавлених печінкових ретиніл ефірів. Гепатостеатоз індукували шляхом утримання експериментальних тварин протягом 16-тижнів на високожировій дієті, збагаченій транс-жирами та з високим вмістом фруктози. Оцінку розвитку гепатостеатозу проводили на основі кількісного визначення рівня триацилгліцеролів та холестеролу в сироватці крові та тканині печінки (із попередньою екстракцію ліпідної фракції за методом Фолча), якісного (з використанням методу електрофорезу) та кількісного аналізу ліпопротеїнів сироватки крові. Біохімічний аналіз інсулінорезистентності проводили на основі визначення показників рівня глюкози натще та сповільненні темпів її кліренсу, визначених у тесті толерантності до глюкози, та рівня глікозильованого гемоглобіну. Результати проведених досліджень показали, що утримання тварин дикого типу на високожировій дієті, призводить до розвитку гепатостеатозу, що виражається у зростанні рівня триацилгліцеролів і холестеролу в печінці та сироватці крові тварин. Проведений якісний та кількісний аналіз ліпопротеїнів сироватки крові виявив зростання ліпопротеїнів низької густини на 50 %. Одночасно виявлене нами зростання рівня загального холестеролу на 30 % свідчило про накопичення його атерогенної форми. Супутнім проявом гепатостеатозу виявляється інсулінорезистентність та розвиток діабету ІІ типу, які проявляються у достовірно вищих показниках рівня глюкози натще, сповільненні темпів її кліренсу, визначених у тесті толерантності до глюкози, та у зростанні рівня глікозильованого гемоглобіну на 30 %. Відсутність ендогенно-депонованих ретиноїдів у мишей Lrat-/-, забезпечувала резистентність щодо розвитку неалкогольного ожиріння печінки. Зокрема досліджувані показники: рівень триацилгліцеролів і холестеролу в печінці та сироватці крові тварин .не відрізнялись від величин, характерних для тварин, яких утримували на стандартній дієті. Водночас у тварин-нокаутів не спостерігалася поява ознак інсулінорезистентності, а рівень глікозильованого гемоглобіну і толерантність до глюкози не відрізнялись від величин, характерних для тварин, яких утримували на стандартній дієті.
Ключові слова: гепатостеатоз, ретиноїди, інсулінорезистентність, неалкогольна жирова хвороба печінки.
Посилання
Chen G. Roles of Vitamin A Metabolism in the Development of Hepatic Insulin Resistance. G. Chen. ISRN Hepatology. 2013; 2013(4): 1-21.
Folch J. A simple method for the isolation and purification of total lipides from animal tissues. J. Folch, M. Lees, G. H. Sloane Stanley. J. Biol. Chem. 1957; 226: 497-509.
Guide for the care and use of laboratory animals. - Washington D. C.: National Academies Press; 2011.
Harisa G. I. Low density lipoprotein bionanoparticles: from cholesterol transport to delivery of anti-cancer drugs. G. I.Harisa and F. K. Alanazi. Saudi Pharm. J. 2014; 22(6): 504-515.
Herbert K. Polyacrylamide-Gel Disc-Electrophoresis as a Screening Procedure for Serum Lipoprotein Abnormalities. K. Herbert, N. M. Wada, L. A. Ehrhart [et al.]. Clin. Chem. 1973; 19(2): 228-234.
Pooranaperundevi M. Insulin resistance induced by a high-fructose diet potentiates thioacetamide hepatotoxicity. M. Pooranaperundevi, M. S. Sumiyabany, P. Viswanathan. Singapore Med. J. 2010; 51(5): 390-397.
Reeves P. G. AIN-93 Purified Diets For Laboratory Rodents: Final Report of the American Institute of Nutrition Ad Hoc Writing Committee on the Reformulation of the AIN-76A Rodent Diet. P. G. Reeves, F. H. Nielsen, G. C. Fahey. J. Nutrition. 2009; 8(1): 12-24.
Saini V. Molecular mechanisms of insulin resistance in type 2 diabetes mellitus. V. Saini. World J. Diabetes. 2010; 1(3): 68-75.
Sorhede Winzell M. The High-Fat Diet – Fed Mouse. A Model for Studying Mechanisms and Treatment of Impaired Glucose Tolerance and Type 2 Diabetes. M. Sorhede Winzell, B. Ahren. Hepatology. 2004; 53(3): 215-219.
Targher G. Prevalence of nonalcoholic fatty liver disease and its association with cardiovascular disease among type 2 diabetic patients. G. Targher, L. Bertolini, R. Padovani [et al.]. Diabetes Care. 2007; 30(12): 1212-1218.
Tetri L. H. Severe NAFLD with hepatic necroinflammatory changes in mice fed trans fats and a hight-fructose corn syrup equivalent. L. H. Tetri, M. Basaranoglu, E. M. Brunt [et al.]. Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 2008; 295(3): 234-242.
Tomita K. Free Cholesterol Accumulation in Hepatic Stellate Cells: Mechanism of Liver Fsbrosis Aggravation Nonalcoholic Steatohepatitis in Mise. K. Tomita, T. Teratani, T. Suzuki [et al.]. Hepatology. 2014; 59(4): 155-169.
Uehara Y. High-density lipoprotein and atherosclerosis: Roles of lipid transporters. Y. Uehara and K. Saku. World J. Cardiol. 2014; 6(10): 1049-1059.
